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本期目录

  • 生物技术进展
    2023年 第13卷 第2期 发布日期:2023-03-25

进展评述

研究论文

  • PIM1激酶在顺铂诱导的急性肾损伤中的作用
  • 李玉珍, 朱杰夫, 吴雄飞
  • 2023 Vol. 13 (2): 298-304. DOI:10.19586/j.2095-2341.2022.0200
  • 摘要 ( ) HTML ( ) PDF (3088KB)( )
  • PIM1是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,参与多种信号通路调控,在许多疾病中发挥重要作用。为了探讨PIM1激酶在顺铂诱导的急性肾损伤中的表达情况及其作用,选取C57BL/6小鼠和肾小管细胞作为实验对象。采用腹腔注射顺铂构建顺铂诱导的急性肾损伤小鼠模型,通过检测肌酐尿素氮水平,HE染色检测肾组织病理变化,qRT-PCR和Western blot检测肾组织PIM1 mRNA和蛋白表达水平。腺病毒感染肾小管细胞构建PIM1过表达顺铂损伤模型,qRT-PCR和Western blot检测p62、Beclin-1和LC3B的表达水平,CCK-8以及流式细胞术评价肾小管细胞损伤情况。结果表明,在小鼠模型中,腹腔注射顺铂后血清肌酐和尿素氮水平显著升高,小鼠肾脏组织病理呈急性肾小管坏死状,肾组织中PIM1 mRNA与PIM1蛋白表达水平显著升高。在肾小管细胞模型中,PIM1过表达处理后,PIM1 mRNA及PIM1蛋白水平显著升高;顺铂处理后,肾小管细胞活性下降、细胞凋亡增加,过表达PIM1顺铂处理组较单纯顺铂处理组细胞活性增高,细胞凋亡率降低,细胞损伤减轻。顺铂处理后,肾小管细胞中p62蛋白表达减少,Beclin-1、LC3B蛋白表达增加,自噬激活;过表达PIM1顺铂处理组较单一顺铂处理组细胞p62蛋白表达增加,Beclin-1、LC3B蛋白表达减少,自噬减弱。研究结果说明,PIM1在Cis-AKI模型中被激活,过表达PIM1可以减轻顺铂导致的肾小管细胞损伤,这可能与其抑制细胞过度自噬有关。

  • 褪黑素联合顺铂对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡及侵袭的影响
  • 沈云燕, 邱琦
  • 2023 Vol. 13 (2): 311-317. DOI:10.19586/j.2095-2341.2022.0099
  • 摘要 ( ) HTML ( ) PDF (2302KB)( )
  • 探究了褪黑素(melatonin, MLT)联合顺铂(cisplatin, DDP)对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡及侵袭的影响。体外培养宫颈癌HeLa细胞,利用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)法测定MLT、DDP及其联合使用对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响;将HeLa细胞分为对照组、褪黑素组、顺铂组和联合组;其中褪黑素组采用2.5 mmol·L-1的褪黑素处理细胞;顺铂组采用5 μg·mL-1的顺铂处理细胞;联合组采用2.5 mmol·L-1的褪黑素+5 μg·mL-1的顺铂联合处理。采用克隆形成实验、流式细胞仪、划痕实验和Transwell小室实验分别检测各组HeLa细胞的增殖、凋亡、侵袭情况,蛋白质印迹法检测Ki-67、PCNA、Bcl-2、Bax、N钙粘蛋白(N-cadherin)、E钙粘蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)蛋白表达情况。MTT结果显示MLT、DDP可以显著抑制宫颈癌HeLa细胞的增殖(P<0.05),且随着使用浓度的升高抑制率显著升高;相比单独使用MLT、DDP,联合使用MLT和DDP可以显著升高对HeLa细胞增殖的抑制率(P<0.05)。相比对照组,褪黑素组和顺铂组细胞克隆形成率、单位面积侵袭细胞数目、划痕愈合率以及Ki67、PCNA、Bcl-2、E-cadherin蛋白相对表达水平均降低(P<0.05),细胞凋亡率和蛋白Bax、N-cadherin、Vimentin相对表达水平升高(P<0.05)。相比褪黑素组和顺铂组,联合组细胞克隆形成率、单位面积侵袭细胞数目、划痕愈合率、Ki67、PCNA、Bcl-2、E-cadherin蛋白相对表达水平均降低(P<0.05),细胞凋亡率、Bax、N-cadherin、Vimentin蛋白相对表达水平升高(P<0.05)。结果表明,MLT和DDP均可抑制宫颈癌HeLa细胞增殖和侵袭并促进其凋亡,且联合使用效果更为显著。