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• 生物技术进展
  2015年 第5卷 第2期 发布日期：2015-03-25

进展评述

• 基于高通量测序的宏基因组学技术在动物胃肠道微生物方面的研究进展
• 吴森,张莺莺,昝林森,
• 2015 Vol. 5 (2): 77-84. DOI:10.3969/j.issn.2095-2341.2015.02.01
• 摘要 ( ) PDF (1413KB)( )
• 微生物在自然界普遍存在,且具有降解植物细胞壁的特殊功能。动物胃肠道寄生的微生物与宿主生长发育和机体代谢密切相关，可以帮助动物将植物源性物质转化为机体所需要的营养物质。基于高通量测序的宏基因组学技术和分析方法的改进，使人们对复杂环境中微生物的研究更加方便、透彻。而宏基因组学技术应用于动物胃肠道微生物的研究，则有助于挖掘胃肠道微生物基因库并筛选其中的功能基因。这不仅对动物生长发育调控、疾病预防等基础研究具有重要意义，而且在工业生产及食品安全等领域也发挥着重要作用。就基于高通量测序技术的宏基因组技术在动物胃肠道微生物分类、功能应用等方面的研究进行了梳理和综述，旨在为动物科学生产及微生物发酵等相关领域的研究工作提供科学指导。

• 我国微藻生物柴油的研究背景与发展战略
• 吴立柱,窦世娟,从均广,杨国军,刘建凤,4
• 2015 Vol. 5 (2): 85-88. DOI:10.3969/j.issn.2095-2341.2015.02.02
• 摘要 ( ) PDF (1425KB)( )
• 生物柴油是可再生能源开发利用的重要发展方向。藻类制备生物柴油具有产油量高、生长速度快、环境适应能力强、不与农作物争夺农田和淡水资源等优势。从微藻制备生物柴油着手，简要介绍了生物柴油的生产原料与发展历程、微藻油脂的组成与生物合成途径、微藻制备柴油的工艺与瓶颈及解决策略，最后对微藻制备生物柴油技术提出了近中远期发展目标及展望。

• 真菌苯二酚内酯聚酮类化合物生物合成研究进展
• 王晓婧,陆伟,徐玉泉,梁晓东
• 2015 Vol. 5 (2): 89-94. DOI:10.3969/j.issn.2095-2341.2015.02.03
• 摘要 ( ) PDF (1748KB)( )
• 真菌苯二酚内酯类聚酮化合物具有抗癌和调节免疫系统等重要的生物活性，其生物合成是近年来的研究热点。介绍了苯二酚内酯的双聚酮合酶协作合成机制和组合生物合成，并以几种真菌苯二酚内酯生物合成途径为例，综述了相关的研究进展，以期为研究者提供参考。

• 芽胞杆菌高效分泌表达异源蛋白的研究进展
• 王培立,王平,田健,伍宁丰,姚斌
• 2015 Vol. 5 (2): 95-102. DOI:10.3969/j.issn.2095-2341.2015.02.04
• 摘要 ( ) PDF (2577KB)( )
• 外泌蛋白易于分离纯化，有利于以较低的生产成本获得大量的目标蛋白，因此分泌表达是一种理想的外源基因的表达方式。芽胞杆菌由于其具有较好的分泌能力，被认为是一种理想的表达外源基因的宿主。到目前为止已有大量来源于不同生物的外源基因在芽胞杆菌中实现了高效分泌表达。但是芽胞杆菌的分泌表达系统仍然存在很多问题，如对某些目的蛋白的分泌量低等，限制了其作为“细胞工厂”生产目标蛋白的应用。综述了芽胞杆菌的外泌系统，分析了芽胞杆菌分泌蛋白过程中的限制因素，并总结了相关的解决方案。

• 大豆种质资源遗传多样性研究进展
• 何真,韵晓东,武凯,姬虎太,常建忠,乔麟轶,郑军
• 2015 Vol. 5 (2): 103-108. DOI:10.3969/j.issn.2095-2341.2015.02.05
• 摘要 ( ) PDF (1042KB)( )
• 我国拥有丰富的大豆种质资源，大豆种质资源遗传多样性研究也取得了较大进展。总结了近年来大豆种质资源组成、保存、研究、利用等几方面的研究进展，讨论了大豆遗传多样性的重要性和发展方向，以期为大豆优良品种培育相关研究提供参考。

• 玉米赖氨酸相关基因opaque-2及其修饰基因研究进展
• 史庆玲,董永彬,周强,马智艳,乔大河,邓飞,李玉玲
• 2015 Vol. 5 (2): 109-112. DOI:10.3969/j.issn.2095-2341.2015.02.06
• 摘要 ( ) PDF (1091KB)( )
• 玉米隐性突变o2基因能通过减少醇溶蛋白的合成来显著提高赖氨酸含量，为培育高赖氨酸含量的优质蛋白玉米（quality protein maize, QPM）提供了良好的基因资源。对玉米o2基因的发现、研究现状及其修饰基因的研究进展，以及当前育种家利用这两种基因相互作用培育优质蛋白玉米的研究进展进行了综述，以期为高赖氨酸玉米育种提供参考。

• 肝细胞癌循环肿瘤细胞标志物及检测方法研究进展
• 王姣姣,耿圆圆,张家耀,姜伟
• 2015 Vol. 5 (2): 113-119. DOI:10.3969/j.issn.2095-2341.2015.02.07
• 摘要 ( ) PDF (1099KB)( )
• 肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)在中国是一种高发病率和高死亡率的恶性肿瘤。肿瘤切除、肝移植是治疗该病最有效的手段，但术后的高复发率和高转移率是影响患者预后的重要因素。外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells, CTCs)是导致肝细胞癌术后复发和转移的必要因子。综述了CTCs的标记物——磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3、转铁蛋白受体、甲胎蛋白、α-L岩藻糖苷酶、上皮细胞粘附因子、高尔基蛋白73和异常凝血酶原等，以及利用这些标记物检测CTCs的特异性和灵敏度，以期为肝细胞癌转移的早期检测、术后的复发、预后评估和选择治疗方案等提供依据。

研究论文

• 玉米淀粉分支酶基因SBEⅡb高效沉默表达载体的构建及转化表达
• 李楠,赵吉元,尹悦佳,柳青,郭嘉,王云鹏,刘相国,郝东云,贺红霞
• 2015 Vol. 5 (2): 120-126. DOI:10.3969/j.issn.2095-2341.2015.02.08
• 摘要 ( ) PDF (4992KB)( )
• 淀粉分支酶（starch branching enzyme, SBE）是淀粉合成的限速酶。为了进一步研究SBEⅡb沉默对玉米生长及直链淀粉合成的影响，克隆了玉米（Zea mays）淀粉分支酶SBEⅡb基因片段，构建了SBEⅡb的发卡结构表达载体pTFU-SBEⅡb hairpin，用农杆菌介导法将其导入玉米HiⅡ幼胚中，经除草剂筛选获得了194株转化再生植株，其中4株结实，获得转基因种子35粒。T1代植株经PCR及试纸条检测获得3株阳性材料，半定量RT-PCR结果得出SBEⅡb的表达量降低，推断出基因表达水平降低对直链淀粉的合成具有正效应。

• 转GmTMT2a基因玉米抗旱功能分析
• 张靓,张兰,王晓萍
• 2015 Vol. 5 (2): 127-131. DOI:10.3969/j.issn.2095-2341.2015.02.09
• 摘要 ( ) PDF (1517KB)( )
• 生育酚具有很强的抗氧化功能，其中α-生育酚是最有效的组分。研究了α-生育酚含量提高的转GmTMT2a基因植株（TP）和野生型植株（WT）在干旱条件下的响应差异。结果表明，TP植株和WT植株中H2O2 含量均有所增加，但TP植株中累积了更少的H2O2；抗氧化酶类SOD、POD和CAT的酶活测定结果表明，CAT酶活性在TP植株中的增幅最大；抗旱相关基因表达分析结果显示，P5CS和TPS在TP植株中的表达显著上调。推测转GmTMT2a基因后，提高了CAT的酶活以及P5CS和TPS的表达量，进而增强了植株的抗旱性。

• 猪SsBHMT基因的原核表达及条件优化
• 余爱丽,赵晋锋,张晏萌,张正,郭二虎
• 2015 Vol. 5 (2): 132-136. DOI:10.3969/j.issn.2095-2341.2015.02.10
• 摘要 ( ) PDF (6109KB)( )
• 甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶（BHMT）是一种甲基代谢酶，催化甜菜碱转甲基到高半胱氨酸生成甲硫氨酸。对含有pET30a-SsBHMT重组质粒的菌株进行诱导表达分析，通过对菌株、IPTG诱导浓度、时间等诱导表达条件进行优化，结果表明：该目的蛋白主要以包涵体的形式出现；经过条件优化，目的蛋白表达量在上清和沉淀中均有所增加，但仍主要以包涵体的形式存在；大肠杆菌菌株ER2566为适合目的蛋白表达的菌株;在37℃，IPTG浓度为0.4 mmol/L，诱导时间为10 h的条件下，目的蛋白表达量最多。研究结果为进一步蛋白纯化与抗体制备奠定了基础。

• Gordonia sp. LAM0048的分离鉴定及其降解正十六烷的研究
• 陈小蓉,,阮志勇,王彦伟,王慧敏,郭翔,孔德龙,邵承斌
• 2015 Vol. 5 (2): 137-141. DOI:10.3969/j.issn.2095-2341.2015.02.11
• 摘要 ( ) PDF (3306KB)( )
• 以正十六烷为唯一碳源，从长期受石油污染的土壤中筛选到一株高效降解正十六烷的菌株LAM0048。通过形态学观察、生理生化试验、细胞化学组分分析、16S rRNA基因序列分析、细胞脂肪酸和极性脂试验，确定其属于棒杆菌亚目(Corynebacterineae)、诺卡菌科(Nocardiaceae)、戈登氏属(Gordonia)，且可能为戈登氏属的一株新种。采用单因素实验对菌株LAM0048在无机盐培养基中降解正十六烷的降解率进行初步探讨，发现该菌株能在以正十六烷为唯一碳源的培养基中生长，菌株LAM0048能够在36 h内完全降解0.05%(V/V)的正十六烷，当烷烃浓度达到1.0%(V/V)时，降解率达46.4%。结果表明LAM0048是一株具有耐受高浓度烷烃的石油降解菌，在石油污染环境的微生物修复中具有一定的应用潜力。

• 埃博拉病毒疫苗研究进展及相关专利浅析
• 李有朝,蔡玉品,郝佳
• 2015 Vol. 5 (2): 142-147. DOI:10.3969/j.issn.2095-2341.2015.02.12
• 摘要 ( ) PDF (1516KB)( )
• 通过非专利数据库的文献检索，总结了埃博拉病毒（EBOV）研究的最新进展，通过专利文献数据库文献检索分析EBOV疫苗的专利申请基本情况、发展趋势和技术点。结果发现专利申请量与疫情的爆发有一定的相关性；专利申请人多为政府主导的机构或非营利性机构；最新的专利申请均关注GP蛋白对病毒侵染的重要性，针对GP蛋白的抗体和疫苗正在开发中，其中Mapp生物制药公司的产品“ZMapp”作为试验性生物药物目前效果最佳。

试验报告

• 0.5%藜芦碱可溶液剂防治茄子红蜘蛛田间药效初报
• 焦雪霞,谷培云,王胤,杨金利,张春梅,郑翔
• 2015 Vol. 5 (2): 148-150. DOI:10.3969/j.issn.2095-2341.2015.02.13
• 摘要 ( ) PDF (988KB)( )
• 藜芦碱可是一种新型植物源农药。通过田间试验对0.5%藜芦碱可溶液剂防治茄子红蜘蛛的效果进行分析。结果表明，0.5%藜芦碱可溶剂300倍液对红蜘蛛有一定的防治效果，初次药后3 d和二次药后5 d的防治效果较低，但末次药后5 d平均防效可达到71.63%。因此，该药剂防治红蜘蛛具有速效性差、持效性好的特点，可用于春季红蜘蛛高发期之前的防治，或与化学药剂交替使用以减轻化学农药对环境和生态的影响。