生物技术进展 ›› 2020, Vol. 10 ›› Issue (3): 273-283.DOI: 10.19586/j.2095-2341.2019.0132
李芳芳,穆登彩,杨春艳,王磊,沈昊,郑尚永*
LI Fangfang, MU Dengcai,YANG Chunyan, WANG Lei, SHEN Hao, ZHENG Shangyong
摘要: 驱动蛋白与肿瘤的发生有密切联系,但对 KIF26B驱动蛋白在非小细胞肺癌的表达和相关功能作用的研究甚少。为了探索KIF26B在非小细胞肺癌中的表达水平及潜在机制,通过干扰KIF26B后探索对非小细胞肺癌增殖、侵袭、迁移、细胞周期、凋亡以及相关蛋白表达量的影响。对mRNA TCGA 数据库信息分析得出,KIF26B基因在非小细胞肺癌中高表达。qRT-PCR 检测 KIF26B在几株常见非小细胞肺癌细胞系中的表达水平,筛选出 KIF26B在A549 和 NCI-H292细胞系中高表达。利用 RNA干扰技术(RNA interference, RNAi)敲低 A549 和 NCI-H292细胞的 KIF26B基因,通过CCK8、采用实时细胞分析仪、平板克隆及 Transwell 实验检测敲低 KIF26B基因后的生物学功能,免疫印迹法检测蛋白表达水平。结果显示,敲低KIF26B后A549 和 NCI-H292细胞增殖明显降低,侵袭及迁移能力明显减弱。敲低KIF26B后阻碍了A549 和 NCI-H292细胞从G1期向S期的转变,同时凋亡细胞明显增多,与之相关的细胞周期蛋白 D1、Bcl-2、E-cadherin和Vimentin的表达水平显著下调,同时活化的半胱天冬酶-3(active Caspase-3)和其剪切底物 PARP1 的剪切体(cleaved PARP1)表达水平显著上调。结果表明KIF26B可能作为非小细胞肺癌发生的促癌基因,参与了非小细胞肺癌的发生及发展过程。KIF26B有望成为非小细胞肺癌治疗的潜在靶点。