本期目录
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生物技术进展
2014年 第4卷 第2期
发布日期:2014-03-25
进展评述
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假单胞菌中影响碳代谢的三种途径及其调控机制
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谷伟,战嵛华,邓志平,陆伟
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2014 Vol. 4 (2):
96-101.
DOI:10.3969/j.issn.2095-2341.2014.0 .
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摘要 (
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当环境中存在多种生长介质时,微生物会利用自身的代谢调控系统优先选择最适碳源达到最佳的生长,同时抑制非优势碳源的利用,这种现象叫做碳代谢抑制。目前已知有CbrAB/Crc、CyoABCDE及PTSNtr三个系统参与假单胞菌中碳代谢抑制调控。其中CbrAB/Crc系统由双组份CbrA/CbrB、非编码sRNA以及RNA结合蛋白Crc组成,通过自由Crc的水平来调控非优势碳源代谢基因的转录。CyoABCDE系统由一些末端氧化酶构成,通过电子转移来调控非优势碳源代谢基因的表达。PTSNtr系统由PtsP、PtsO及PtsN三种蛋白组成,通过系统的磷酸化激活PtsN从而对代谢基因进行调控。本文将详细介绍了假单胞菌中三种碳代谢抑制调控系统的作用机制。
研究论文
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FMDV全ORF编码基因的克隆及其腺病毒载体的构建
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高鹏,李志勇,柳纪省
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2014 Vol. 4 (2):
107-112.
DOI:10.3969/j.issn.2095-2341.2014.0 .
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摘要 (
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PDF
(4567KB)(
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为研制O型口蹄疫病毒(FMDV)复制缺陷型腺病毒活载体疫苗毒株,通过RT-PCR方法获得了O型 FMDV的开放阅读框(ORF)基因,并定向克隆到腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,构建了重组腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV-ORF,经PCR、酶切及测序鉴定,克隆得到的ORF编码基因序列与原始强毒株O型FMDV的ORF编码基因相似性达99.8%。将含有目的基因的穿梭质粒线性化后和腺病毒骨架载体pAdeasy-2共同电转化入大肠杆菌BJ5183感受态细胞中,得到重组腺病毒质粒pAd-ORF,经PCR和酶切鉴定正确。本研究成功获得了含有现代O型疫苗用FMDV毒株的全ORF编码基因的阳性克隆,并成功构建了含有完整编码基因表达盒的重组腺病毒穿梭质粒及其腺病毒骨架质粒。
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江蓠内生真菌NSS1蛋白活性的初步研究
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王维才,张付云,刘晔,卢航,李振,赵宇
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2014 Vol. 4 (2):
124-128.
DOI:10.3969/j.issn.2095-2341.2014.02.09
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摘要 (
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PDF
(1364KB)(
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为促进江蓠内生真菌NSS1抗菌蛋白的应用研究,利用硫酸铵沉淀法制备抗菌蛋白,最佳硫酸铵饱和度为65%。采用滤纸片法检测其对细菌指示菌的抑菌活性,抗菌粗蛋白均能抑制五种细菌指示菌的生长,当浓度达到750 μg/mL时,抑制效果最好。采用邻苯三酚自氧化法测定蛋白对超氧阴离子自由基(O-2)的清除作用,MTT法检测蛋白对肿瘤细胞的影响。抗菌蛋白在100℃以下,pH中性时抑菌活性稳定,对紫外线照射不敏感,丙三醇、甲醇和胰蛋白酶对抗菌蛋白的抑菌活性没有影响。不同浓度的蛋白液对超氧阴离子均有清除效果。当蛋白浓度达到360 μg/mL时对肿瘤细胞的抑瘤作用最强。上述结果显示抗菌蛋白具有较强的抑菌活性、抗氧化活性和抗肿瘤活性。
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枣皮红色素理化性质及其食品添加剂研制
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于艳琴,杜京旗,赵君,杨卫民
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2014 Vol. 4 (2):
129-134.
DOI:10.3969/j.issn.2095-2341.2014.0 .
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摘要 (
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PDF
(2271KB)(
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以木枣皮为原料,经酶解、微波超声波萃取仪辅助处理、离心、抽滤和真空减压浓缩后获取红色素制品,并对其的理化性质、质量指标及安全性进行研究。红色素制品呈枣红色颗粒状,具有枣香味;易溶于水、甲酸,不溶于其他有机溶剂;对温度、部分金属离子(K+、Mg2+、Zn2+)、蔗糖、苯甲酸钠、柠檬酸具有较好的稳定性;光照对红色素制品有一定的影响,红色素吸光值呈现先降低后升高的趋势;红色素制品对酸碱度十分敏感,在pH 1.0~7.0范围内不稳定,pH 7.0~14.0较稳定;红色素制品色价为6.52,着色力较弱;经微生物检测,红色素制品菌落总数8×10-5 CFU/mL,细菌污染的可能性很低,大肠菌群MPN值<3,显色呈阴性,无大肠杆菌。结果表明,枣皮红色素是水溶性极好的色素,具有较好的稳定性,且安全、无毒,可用于食品添加剂的研制。
技术与方法