猪α干扰素在家蚕中表达及其抗病毒活性测定

doi:10.3969/j.issn.2095-2341.2013.04.05

生物技术进展 ›› 2013, Vol. 3 ›› Issue (4): 252-256.DOI: 10.3969/j.issn.2095-2341.2013.04.05

猪α干扰素在家蚕中表达及其抗病毒活性测定

钟鲁龙1,易咏竹2,丁农3,张金卫3,柳纪省1*

1.中国农业科学院兰州兽医研究所, 家畜疫病病原生物学国家重点实验室, 农业部草食动物疫病重点开放实验室, 兰州 730046;
2.中国农业科学院蚕业研究所, 江苏镇江 212018;
3.湖州市农业科学院, 浙江湖州 313000

收稿日期:2013-05-17 出版日期:2013-07-25 发布日期:2013-06-14
通讯作者: 柳纪省,研究员，从事动物传染病及其病原分子流行病学研究。Tel:0931-8342682;E-mail:liujixing@hotmail.com
作者简介:钟鲁龙,硕士研究生，研究方向为动物传染病及其病原分子流行病学。E-mail:longginger@163.com。
基金资助:
甘肃省高层次人才科技创新创业扶持行动项目(1013JHTA008)资助。

Expression of Porcine Interferon-alpha in Silkworm, Bombyx mori and its Antiviral Activity Detection

ZHONG Lu-long, YI Yong-zhu, DING Nong, ZHANG Jin-wei, LIU Ji-xing

1.State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology; Key Laboratory of Grazing Animal Dieases, Ministry of Agriculture; Lanzhou Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Lanzhou 730046, China;
2.Sericultural Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Jiangsu Zhenjiang 212018, China;
3.Huzhou Academy of Agricultural Sciences, Zhejiang Huzhou 313000, China

Received:2013-05-17 Online:2013-07-25 Published:2013-06-14

摘要/Abstract

摘要： 本研究利用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕中表达猪α干扰素。首先优化并合成猪α干扰素基因，将其克隆到杆状病毒转移载体pVL1393的多角体基因启动子下游，与线性化的Bm-BacPAK6 DNA共转染至Bm-N细胞，在细胞内进行同源重组后，纯化得到重组病毒。Western杂交结果显示，在蚕血淋巴中可检测到猪α干扰素表达。用微量细胞病变抑制法在Vero/VSV*GFP系统上进行干扰素活性测定，结果表明重组猪α干扰素有抗病毒活性，效价达到106 U/mL以上，证明在家蚕幼虫体内成功表达了有活性的猪α干扰素。

关键词: 猪干扰素, 抗病毒活性, 家蚕, 杆状病毒, 真核表达

Abstract: Porcine interferon-alpha(PoIFNα) was expressed in silkworm larvae using silkworm-baculovirus expression system. The porcine interferon-alpha gene was artificially synthesized after codon optimization. The optimized target gene was cloned to the baculovirus transfer vector pVL1393 and the recombinant plasmid pVL-PoIFNα was constructed. pVL-PoIFNα was co-transfected with linearized Bm-BacPAK6 DNA into Bm-N cells. The recombinant proteins were successfully detected in hemolymph by Western blot analysis. The recombinant PoIFN-alpha expressed in hemolymph were verified to be of high antiviral activity by inhibiting the cytopathic effect of VSV*GFP in Vero cells, which was about 106 U/mL.

Key words: porcine interferon, antiviral activity, silkworm, baculovirus, eukaryotic expression

钟鲁龙,易咏竹,丁农,张金卫,柳纪省. 猪α干扰素在家蚕中表达及其抗病毒活性测定[J]. 生物技术进展, 2013, 3(4): 252-256.

ZHONG Lu-long1, YI Yong-zhu2, DING Nong3, ZHANG Jin-wei3, LIU Ji-xing1*. Expression of Porcine Interferon-alpha in Silkworm, Bombyx mori and its Antiviral Activity Detection[J]. Curr. Biotech., 2013, 3(4): 252-256.

[1]	杨鑫,宋浩志,刘兴健,李轶女,张志芳. 鸡κ干扰素在家蚕杆状病毒表达系统中的表达及其抗病毒活性检测[J]. 生物技术进展, 2020, 10(3): 251-255.
[2]	李国华,高锦伟,周希胜,王霞,程伟华4. TIG-Fc真核表达载体的构建及其对自然杀伤细胞功能的影响[J]. 生物技术进展, 2020, 10(1): 90-96.
[3]	王先翔,赵泽,王朋,刘兴健,胡小元,张志芳,李轶女,房岭丽,叶爱华. 羊λ3干扰素在家蚕杆状病毒表达系统中的表达及其抗病毒活性检测[J]. 生物技术进展, 2019, 9(5): 502-508.
[4]	杜梦潭,刘兴健,胡小元,张志芳,李轶女. 腺相关病毒的生产方式及其在基因治疗中的应用[J]. 生物技术进展, 2019, 9(4): 326-331.
[5]	赵璐璐,赵泽,杨鑫,刘兴健,胡小元,张志芳,李轶女. 牛λ3干扰素在家蚕杆状病毒表达系统中的表达及其抗病毒活性检测[J]. 生物技术进展, 2018, 8(5): 420-425.
[6]	鲁念,刘兴健,胡小元,李轶女,易咏竹,张志芳. 利用BmNPV-家蚕表达系统包装重组腺相关病毒2型（rAAV2）研究[J]. 生物技术进展, 2018, 8(1): 71-77.
[7]	张永红,朱峰,唐芬芬,邵榆岚,于滨,白兴荣. 家蚕云7A Sericin1基因启动子克隆及活性分析[J]. 生物技术进展, 2016, 6(6): 443-448.
[8]	吕言娜,陈晓妍,邵丽萍,李轶女,胡小元,张志芳,易咏竹. 家蚕淀粉酶基因的克隆、表达与分析[J]. 生物技术进展, 2016, 6(3): 193-199.
[9]	刘兴健,杨鑫,张志芳,李轶女,易咏竹,胡小元. 猫ω-like干扰素在家蚕中的表达和生物活性检测[J]. 生物技术进展, 2015, 5(6): 441-445.

猪α干扰素在家蚕中表达及其抗病毒活性测定

Expression of Porcine Interferon-alpha in Silkworm, Bombyx mori and its Antiviral Activity Detection

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