生物技术进展 ›› 2020, Vol. 10 ›› Issue (3): 256-264.DOI: 10.19586/j.2095-2341.2019.0084
席圆圆§,徐宏彦§,刘霞,尹慧青,刘晓盼,王庆路,王清路*
XI Yuanyuan, XU Hongyan, LIU Xia, YIN Huiqing, LIU Xiaopan, WANG Qinglu, WANG Qinglu
摘要: 近年来,高尿酸血症(hyperuricemia,HUA)在人群中频发,危害性强,并发症多。为了探究日常饮品——半发酵茶铁观音茶水对于缓解HUA是否具有辅助作用,以小鼠为实验对象,采用氧嗪酸钾和次黄嘌呤联合法构建小鼠高尿酸血症模型,21只模型鼠随机分为模型组、铁观音茶水提物组、阳性药物组,7只非模型鼠作为对照。做不同处理2周后,取小鼠血清及肾、肝、小肠。观察各器官病理变化,从细胞层面鉴定铁观音茶水提物对高尿酸血症小鼠各脏器的影响;测定与HUA相关度较高的生化指标:血清尿酸(uric acid,UA)浓度、肝黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)活力,以明确造模是否成功以及判断铁观音茶水提物对HUA是否具有缓解作用;利用qRT-PCR检测尿酸合成和排泄相关基因的mRNA表达水平,并利用Western blot检测肝XOD蛋白的表达水平,以从分子层面明确铁观音茶水提物对HUA的影响。病理切片显示,相比于阳性药物组,铁观音茶水提物组小鼠的肾和肝损害程度较轻;生化指标测定结果显示,铁观音茶水提物可降低血清尿酸水平,并且抑制XOD活性;从分子层面可以看出,铁观音茶水提物显著升高了尿酸重吸收转运体尿酸转运蛋白1(uric acid transporter 1,URAT1)和有机阴离子转运蛋白3(organic anion transporter 3,OAT3)的mRNA表达水平(P<0.05),显著降低了葡萄糖转运子9(glucose transporter 9,GLUT9)和有机阴离子转运蛋白1(organic anion transporter 1,OAT1)的表达水平(P<0.05)。虽然qRT-PCR和Western blot提示,XOD的mRNA和蛋白质的表达水平升高,但尿酸生成量却下降,推测可能是铁观音茶水提物中的某种成分使得无催化活性的XOD蛋白表达增加进而对XOD基因的转录表达造成一种正反馈。研究提示,铁观音茶水提物对小鼠高尿酸血症具有缓解作用,其缓解高尿酸血症的作用与抑制XOD活性、干预尿酸生成过程和刺激或抑制相关阴离子转运体mRNA的表达相关。